产品货号：
BM0327
中文名称：
T7 RNA聚合酶
英文名称：
T7 RNA Polymerase
产品规格：
5kU|25kU
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是大肠杆菌重组表达来源的噬菌体T7 RNA聚合酶，是一种依赖DNA的RNA聚合酶，对噬菌体T7启动子序列具有高度特异性。T7 RNA聚合酶以含有T7启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。
- 合成单链RNA，包括mRNA，siRNA，gRNA等各类RNA的前体。
- 合成标记或未标记的高特异性RNA探针。
- 利用帽子类似物合成加帽的mRNA。
1活性单位(U)是指在37℃ 1h内使1nmol ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
| 组分 | 5kU | 25kU |
| T7 RNA Polymerase(50U/μL) | 100μL | 500μL |
| 10×T7 RNA Polymerase Buffer | 1.25mL | 1.25mL |
保存：-20℃
- 蛋白纯度检测：本品经SDS-PAGE检测纯度≥95%。
- 核酸内切酶残留检测：将酶液与超螺旋质粒DNA在37℃温育4h，通过DNA电泳检测质粒无变化。
- DNase残留检测：将酶液与双链DNA底物在37℃温育16h，通过DNA电泳检测双链DNA底物无变化。
- RNase残留检测：将酶液与RNA在37℃温育1h，通过电泳检测RNA无降解。
- 功能检测：体外转录合成实验，通过RNA电泳可以检测到目的条带。
- 模板DNA的纯度对体外转录反应至关重要。质粒DNA抽提过程中引入的RNase A残留会显著影响转录RNA的质量，建议使用OD260/280为1.8~2.0的高纯度RNase-free质粒。
- 模板DNA可通过线性化环状质粒或PCR获得。模板DNA上游需含有T7启动子序列，下游为平末端或编码链5'末端突出。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及口罩进行实验操作。
- 推荐反应体系
成分 用量 终浓度 10×T7 RNA Polymerase Buffer 2μL 1× CTP/GTP/ATP/UTP(100mM each) 0.1～0.4μL each 0.5～2mM each RNase Inhibitor(40U/μL) 0.5～1μL 1～2U/μl 模板DNA 0.1～1μg - T7 RNA Polymerase(50U/μL) 1～2μL - Nuclease-Free Water 至20μL - - 推荐反应条件
37℃反应1h，若转录长度＜ 300nt可延长反应时间至2~16h。 - 反应结束后，可向上述20μL反应液中加入1μL dsDNase，37℃孵育15min用于去除DNA模板。
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